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兩種斯赤列提取物促進成骨細胞的增殖與分化

admin2022-10-13 15:21

摘要:

文題釋義:

斯赤列:為忍冬科接骨木屬植物血滿草(Sambucus adnata Wall.),乾燥地上部分或全草入葯,又名血滿草、接骨葯、接骨丹、大血草等,主要分佈于雲南、四川等地,為雲南彝族、傣族等多個民族慣用藥物。其提取物中主要含有三萜、非類固醇等類型成分,具有抑制血管緊張素轉換酶及抗炎、鎮痛等生物活性,彝族人民慣用其治療風濕痹痛、跌打損傷等。

成骨細胞分化:包括細胞外基質的合成、礦化、成熟,整個過程中成骨細胞特異性地合成一些蛋白,參與細胞外基質的合成礦化、成熟。成骨細胞的分化能力是骨形成的關鍵,在骨重建過程中,成骨細胞主導的骨生成結束為骨重建周期終結的標誌。

背景:在骨穩態中,成骨細胞和破骨細胞通過釋放多種調節因子在骨重塑中發揮重要作用,一旦兩種細胞功能和活性的動態平衡被打破,則易引起骨質疏鬆等骨骼疾病。彝族人民常用斯赤列治療跌打損傷、骨折創傷等,作者所在課題組前期研究發現斯赤列的水提取物(SAW-A)和二氯甲烷提取物(SAW-B)為其治療骨折的活性部位,具有促進骨折愈合、改善骨質疏鬆的作用,但其活性部位對成骨細胞增殖、分化作用的影響尚不清楚。

目的:探討斯赤列改善骨質疏鬆的活性部位——水提取物(SAW-A)和二氯甲烷提取物(SAW-B)對成骨細胞增殖與分化的影響。

方法:膠原酶消化法提取新生SD大鼠顱骨成骨細胞,CCK-8試劑盒檢測SAW-A和SAW-B的細胞毒性;分別給予SAW-A(312.5 mg/L)和SAW-B(156.15 mg/L)干預大鼠第3代成骨細胞,于24,48,72 h 用CCK-8試劑盒檢測成骨細胞增殖活性;流式細胞儀檢測SAW-A、SAW-B干預6 d后對細胞活性的影響,通過鹼性磷酸酶染色、茜素紅染色檢測SAW-A、SAW-B干預后成骨細胞的增殖分化情況,實時熒光定量PCR檢測成骨相關基因RUNX2、骨涎蛋白、骨鈣蛋白和Ⅰ型膠原蛋白A1的相對錶達量。

結果與結論:①實驗結果表明,SAW-A和SAW-B干預后48 h及72 h,均可明顯提高成骨細胞的增殖能力,且SAW-B的作用要強於SAW-A;②流式細胞儀結果表明,SAW-A和SAW-B分別干預成骨細胞6 d后,二者均有抑制細胞凋亡的作用;③鹼性磷酸酶和茜素紅的染色結果顯示,SAW-A和SAW-B均可促進成骨細胞成骨礦化;④SAW-A、SAW-B處理后,成骨細胞分化標記基因RUNX2、骨涎蛋白、骨鈣蛋白和Ⅰ型膠原蛋白A1相對錶達量均有上升,而且SAW-B促進骨涎蛋白和Ⅰ型膠原蛋白A1基因表達的作用比SAW-A強;⑤表明斯赤列提取物SAW-A和SAW-B均具有促進成骨細胞分化的作用。

https://orcid.org/0000-0002-6292-8504 (鄭梅梅)

中國組織工程研究雜誌出版內容重點:組織構建;骨細胞;軟骨細胞;細胞培養;成纖維細胞;血管內皮細胞;骨質疏鬆;組織工程

關鍵詞: 斯赤列, 水提取物, 二氯甲烷提取物, 成骨細胞, 細胞增殖, 細胞分化, 骨穩態, 骨質疏鬆

引用本文: 鄭梅梅, 鄭儉彬, 江自鮮, 賈朝玉, 王 濤, 王文靜. 兩種斯赤列提取物促進成骨細胞的增殖與分化[J]. 中國組織工程研究, 2023, 27(11): 1677-1682.

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兩種斯赤列提取物促進成骨細胞的增殖與分化

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