克隆載體

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克隆載體(Cloning Vector):通常採用從病毒質粒或高等生物細胞中獲取的DNA作為克隆載體,在載體上XX合適大小的外源DNA片段,並注意不能破壞載體的自我複製性質。將重組后的載體引入到宿主細胞中,並在宿主細胞中大量繁殖。常見的載體有質粒,噬菌粒,酵母人工染色體

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對載體的要求:①能在宿主細胞中複製繁殖,而且最好要有較高的自主複製能力。

②容易XX宿主細胞,而且XX效率越高越好。

③容易XX外來核酸片段,XX后不影響其XX宿主細胞和在細胞中的複製。這就要求載體DNA上要有合適的限制性核酸內切酶位點

④容易從宿主細胞中分離純化出來, 這才便於重組操作。

⑤有容易被識別篩選的標誌,當其XX宿主細胞、或攜帶著外來的核酸序列XX宿主細胞都能容易被辨認和分離出來。這才介於克隆操作

相關文獻雙元細菌人工染色體基因組文庫研究進展-現代農業科技-2013年 第2期 (3)

穩定表達人SIRT1基因的HEK293細胞系的建立-實用醫學雜誌-2013年 第1期 (3)

PHD類轉錄因子GmPHD2和Bar基因的植物表達載體的構建-科技通報-2013年 第1期 (6)

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對載體的要求:①能在宿主細胞中複製繁殖,而且最好要有較高的自主複製能力。

②容易XX宿主細胞,而且XX效率越高越好。

③容易XX外來核酸片段,XX后不影響其XX宿主細胞和在細胞中的複製。這就要求載體DNA上要有合適的限制性核酸內切酶位點。

④容易從宿主細胞中分離純化出來, 這才便於重組操作。

⑤有容易被識別篩選的標誌,當其XX宿主細胞、或攜帶著外來的核酸序列XX宿主細胞都能容易被辨認和分離出來。這才介於克隆操作


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