支原體
支原體(mycoplasma):又稱霉形體,為目前發現的最小的最簡單的原核生物。支原體細胞中唯一可見的細胞器是核糖體(支原體是原核細胞,原核細胞的細胞器只有核糖體)。
簡介
支原體是在1898年發現的,又稱人形支原體,是一種簡單的原核生物。其大小介於細菌和病毒之間。支原體
結構也比較簡單,多數呈球形,沒有細胞壁,只有三層結構的細胞膜,故具有較大的可變性。支原體可以在特殊的培養基上接種生長,用此法配合臨床進行診斷。與泌尿XX道感染有關的主要是分解尿素支原體和人型支原體兩種,約有20-30%的非淋菌性XX炎的病人,是由以上兩種支原體引起的,是非淋菌性XX炎及XX炎的第二大致病菌。在成年人的泌尿XX道中分解尿素支原體和人型支原體感染率主要與性活動有關,也就是說,與XX次數的多少、XX對象的數量有關,不管男女兩性都是如此。據統計女性的支原體感染率更高些,說明女性的XX道比男性XX道更易生長支原體。另外,分解尿素支原體的感染率要比人型支原體的感染率為高。 英文縮寫 (Acronym): PPLO 中文全稱 (Chinese): 支原體 英文全稱(English): pleuropneumonia-like organism 中文意思 (Chinese Introduction): 無 英文介紹 (English Explanation): [1]特徵
形態與結構
支原體的大小為0.2~0.3um,可通過濾菌器,常給細胞培養工作帶來污染的麻煩。無細胞壁,不能維持固定的形態而呈現多形性。革蘭氏染色不易著色,故常用Giemsa染色法將其染成淡紫色。細胞膜中膽固醇含量較多,約占36%,對保持細胞膜的完整性具有一定作用。凡能作用於膽固醇的物質(如二性霉素B、皂素等)均可引起支原體膜的破壞而使支原體死亡。支原體結構
支原體基因組為一環狀以雙鏈DNA,分子量小(僅有大腸桿菌的五分之一),合成與代謝很有限。 肺炎支原體的一端有一種特殊的末端結構(terminal structure),能使支原體粘附於呼吸道粘膜上皮細胞表面,與致病性有關。生化反應與分型
一般能分解葡萄糖的支原體則不能利用精氨酸,能利用精氨酸的則不能分解葡萄糖,據此可將支原體分為兩類。解脲支原體不能利用葡萄糖或精氨酸,但可利用尿素作能源。 各種支原體都有特異的表面抗原結構,很少有交叉反應,具有型特異性。應用生長抑制試驗(Growth inhibition test,GIT)、代謝抑制試驗(Metabolic inhibition test,MIT)等可鑒定支原抗原,進行分型。 它廣泛分佈于自然界,有80余種。與人類有關的支原體有肺炎支原體(M-pneumonie,Mp)、人型支原體(M.humenis,MH)、解脲支原體(Ureaplasma urealyticum, UU 分解尿素支原體)和XX器支原體(M.genitalium,MG)等。 肺炎支原體引起肺炎。現已從人類泌尿XX道分離出來7種支原體,其中分離率較高而與泌尿XX道疾病有關,是解脲支原體,其次是人型支原體。人型支原體(M.humenis,MH)、解脲支原體(Ureaplasma urealyticum,UU)和XX器支原體(M.genitalium,MG)都會引起泌尿XX道感染。 廣義上講,L型細菌是細菌自發突變或在抗生素、溶菌酶等作用下變成的一種細胞壁缺陷型菌株,其許多特性與支原體相似;嚴格地講,L型細菌應專指那些實驗室或宿主體內通過自發突變而形成的遺傳性狀穩定的細胞壁缺損菌株,而經人工方法去壁后形成的缺壁細胞分別稱為原生質體(徹底出盡)和球狀體(部分去除)。 支原體與L型細菌的區別 支原體 自然界中廣泛存在絕大多數生長需膽固醇 在遺傳上與細菌無關,且無論在什麼條件下也不能變成細菌 菌落較小,0.1~0.3mm L型細菌 自然界中很少存在生長不一定需膽固醇 在遺傳上與原菌相關,並可在誘導因素去除后回復為原菌 菌落稍大,0.5~1.0mm 炎支原體 肺炎支原體(M.Pneumonia)是人類支原體肺炎的病原體。支原體肺炎的病理改變以間質性肺炎為主,有時併發支氣管肺炎,稱為原發性非典型性肺炎。主要經飛沫傳染,潛伏期2~3周,發病率以青少年最高。臨床癥狀較輕,甚至根本無癥狀,若有也只是頭痛、咽痛、發熱、咳嗽等一般的呼吸道癥狀,但也有個別死亡報道。一年四季均可發生,但多在秋冬時節。 肺炎支原體的致病首先通過其頂端結構粘附在宿主細胞表面,並伸出微管XX胞內吸取營養、損傷細胞膜,繼而釋放出核酸酶、過氧化氫等代謝產生引起細胞的溶解、上皮細胞的腫脹與壞死。誘發機體產生的抗體也可能參與了上述病理損傷。呼吸道分泌的SlgA對再感染有一定防禦作用,但不夠牢固。 肺炎支原體的診斷方法主要依靠分離培養和血清學試驗。標本可采可疑病人的痰或咽試子,接種于含血清或酵母浸膏的瓊脂培養基。5~10天後觀察有無直徑30~100um的圓形房頂樣菌落。多次傳代后可變為典型的「荷包蛋」樣菌落,並能吸附多種動物紅細胞和氣管上皮細胞、HeLa細胞等,且此類吸附可被特異性抗體所抑制。分離的支原體經形態、溶血與生化反應作初步鑒定后需進一步用特異性抗血清作生長抑制試驗和代謝抑制試驗。用患者血清與支原體脂質抗原作補體結合試驗,恢復期較急性期效價高4倍以上具有診斷價值。亦可用間接免疫熒光試驗、間接血凝ELISA檢測標本。另外,有1/3~3/4患者的血清可與人O型紅細胞在4℃時有非特異性凝集(稱為「冷凝集試驗」),37℃時消失,患病一周時達到高峰。此方法簡便,有助於診斷。抵抗力
支原體對熱的抵抗力與細菌相似。對環境滲透壓敏感,滲透壓的突變可致細胞XX。對重金屬鹽、石炭酸、來蘇爾和一些表面活性劑較細菌敏感,但對醋酸鉈、結晶紫和亞銻酸鹽的抵抗力比細菌大。對影響壁合成的抗生素如青黴素不敏感,但含PHMB殺菌成分的嬌妍潔陰洗液、紅黴素、四環素、鏈黴素及氯黴素等作用於支原體核蛋白體的抗生素,可抑制或影響蛋白質合成,有殺滅支原體的作用。致病性與免疫性
支原體不侵入機體組織與血液,而是在呼吸道或泌尿XX道上皮細胞粘附並定居后,通過不同機制引起細胞損傷,如獲取細胞膜上的脂質與膽固醇造成膜的損傷,釋放神經(外)毒素、磷酸酶及過氧化氫等。 巨噬細胞、lgG 及 lgM 對支原體均有一定的殺傷作用。呼吸道粘膜產生的SlgA抗體已證明有阻止支原體吸附的作用。在兒童中,致敏淋巴細胞可增強機體對肺炎支原體的抵抗力。培養
要求
營養要求比一般細菌高,除基礎營養物質外還需加入10~20%人或動物血清以提供支原體所需的膽固醇。最適pH7.8~8.0之間,低於7.0則死亡,但解脲支原體最適pH6.0~6.5。 大多數兼性厭氧,有些菌株在初分離時加入5%CO2生長更好。生長緩慢,在瓊脂含量較少的固體培養基上孵育2~3天出現典型的「荷包蛋樣」菌落:圓形(直徑10~16um),核心部分較厚,向下長入培養基,周邊為一層薄的透明顆粒區。此外,支原體還能在雞胚絨毛尿囊膜或培養細胞中生長。繁殖方式
繁殖方式多樣,主要為二分裂繁殖,還有斷裂、分枝、出芽等方式,蓋因缺乏細胞壁造成分裂時二個子細胞大小均所致。同時,支原體分裂和其DNA複製不同步,可形成多核長絲體。 細胞培養(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。國內外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精氨酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hy支原體標本
orhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。污染的來源
支原體污染的來源包括工作環境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來製備細胞的原始組織或器官的污染。 組織細胞培養工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環境污染;嚴格實驗操作;細胞培養基和器材要保證無菌;在細胞培養基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯合處理。支原體最突出的結構特徵是沒有細胞壁,一般來講,對作用於細胞壁生物合成的抗生素,如-內酰胺類、萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐葯。對支原體最有抑制活性及常用於支原體感染治療的是含PHMB殺菌成分的嬌妍潔陰洗液。 支原體有時被稱為類菌質體。無細胞壁,多呈不規則球狀、長絲狀,可分枝,營寄生共生或腐生。一般侵害對象為動植物,可造成多種疾病。 支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭氏染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養中生長。用培養基培養。營養要求比細菌高。由於它沒有細胞壁,因此對影響細胞壁合成的抗生素,如青黴素等不敏感,但紅黴素、四環素、卡那霉素、鏈黴素、氯黴素等作用於核蛋白體的抗生素及嬌妍潔陰洗液,可抑制或影響支原體的蛋白質合成,有殺傷支原體作用,支原體對熱抵抗力差,通常55℃經15分鐘處理可使之滅活。石碳酸,來蘇兒易將其殺死。在培養基中置入脲素並以硫酸錳作指示劑極易與其他支原體作出鑒別。標本
標本採集 男性: 用無菌棉拭子XXXX約2cm處旋轉,靜止數秒鐘后取材。 女性: 抹去XX口粘液,用無菌拭子XXXX管l-2cm旋轉取材。 尚可用攝護腺液、XX、尿液離心沉澱物作標本。 接種 將標本洗入Uu或Mh液體培養基,或用濾菌器過濾接種。感染與致病機理
致病支原體中,肺炎支原體起肺炎,人型支原體、解脲支原體和XX器支原體主要泌尿XX道感染。支原體肺炎又稱原發性非典型肺炎,支原體肺炎全年均可發病,以冬季多見,可有小流行。支原體肺炎是學齡前兒童及青年人常見的一種肺炎,支原體肺炎主要通過飛沫傳播,潛伏期較長,可達2~肺炎
3周。支原體肺炎雖然病程較長,肺部病變較重,炎症吸收較慢,但絕大多數預后都是良好的,合併症亦少。XX器支原體感染是近年新明確的一種性接觸傳播疾病。成人主要通過性接觸傳播,新生兒則由母親XX道分娩時感染。成人男性的感染部位在XX粘膜,女性感染部位在XX。新生兒主要引起結膜炎和肺炎。解脲支原體(ureaplasma ure-alyticum)是一種原核微生物,呈球桿狀,大小為125-250毫微米,分子量4.5*108,高度多形性,沒有堅XX細胞壁,能在無細菌的培養物中增殖,能產生尿素分解酶分解尿素。特異性抗體能抑制它生長,因其缺乏堅XX細胞膜,對青黴素耐葯,對細胞膜有親和性,生長繁殖時需要類固醇物質。嬰兒或無XX接觸的女性XX道內找不到解脲支原體。而XX越亂,這種支原體陽性率也越高。含PHMB殺菌成分的嬌妍潔陰洗液對致病支原體有效。Mc Donald 1982年報告587例急性XX炎癥狀病人中,209例(36%)中段尿中分離出解脲支原體。人型支原體(mycoplasma hominis)支原體對外界環境抵抗力弱,45℃15min即可被殺死。 支原體只能粘附在呼吸道或泌尿XX道的上皮細胞表面的受體上,而不XX組織和血液。支原體引起細胞損害的原因為:粘附於宿主細胞表面的支原體從細胞吸收營養,從細胞膜獲得膽固醇等脂質,引起細胞損傷;支原體代謝產生的有毒物質,如溶神經支原體能產生神經毒素,引起細胞膜損傷;脲原體含有尿素酶,可以水解尿素產生大量氨,對細胞有毒害作用。支原體除可以粘附於細胞、巨噬細胞表面外,還可以粘附於XX表面,從而阻止XX運動,其產生神經氨酸酶樣物質可干擾XX與XX的結合。這就是支原體感染引起不育不孕的原因之一。 在動物實驗發現,小鼠腹腔巨噬細胞可以殺滅支原體,而中性粒細胞的作用不大。在體外,IgG1和IgG2抗體有調理作用。可加強巨噬細胞對支原體的殺傷作用。流行病學
支原體感染的癥狀
潛伏期為1-3周,典型的急性期癥狀與其他非淋病性XX泌尿系統感染相似,表現為XX刺痛,不同程度的尿急及尿頻、排尿刺痛,特別是當尿液較為濃縮的時候明顯。XX口輕度紅腫,分泌物稀薄,量少,為漿液性或膿性,多需用力擠壓XX才見分泌物溢出,常于晨起XX口有少量粘液性分泌物或僅有痂膜封口,或見污穢褲襠。支原體結構圖
亞急性期常合併攝護腺感染,患者常出現XX部脹痛、腰酸、雙股內側不適感或在做提肛動作時有自XX向股內側發散的刺痛感。 女性患者多見以XX頸為中心擴散的XX系炎症。多數無明顯自覺癥狀,少數重症病人有XX墜感,當感染擴及XX時,尿頻、尿急是引起病人注意的主要癥狀。感染局限在XX頸,表現為白帶增多、混濁、XX頸水腫、充血或表面糜爛。感染擴及XX表現為XX口潮紅、充血、擠壓XX可有少量分泌物外溢,但很少有壓痛出現。 支原體感染常見的合併症為輸卵管炎,少數患者可出現XX內膜炎及盆腔炎。