白喉桿菌

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白喉桿菌(Corynebacterium diphtheriae)是引起小兒白喉的病原菌,屬於棒狀桿菌屬(Corynebacterium)。棒狀桿菌種類較多,包括白喉桿菌和類白喉桿菌。類白喉桿菌為非致病菌,常見的有假白喉桿菌,結膜乾燥桿菌、潰瘍桿菌和痤瘡桿菌等。本章介紹白喉桿菌。

生物學性狀

形態染色

  白喉桿菌細長稍彎,排列不規則,常呈L、V、X、T等字形或排成柵欄狀。革蘭氏染色陽性;用美蘭液染色菌體著色不均勻,常呈著色深的顆粒;用奈瑟氏染色菌體染成黃褐色,一端或二端染成藍色或深藍色顆粒,稱為異染顆粒(Metachromatic granules),是本菌形態特徵之一。

培養特性

  白喉桿菌為需氧菌兼性厭氧菌,最適溫度為37℃,最適PH為7.2~7.8,在

白喉棒桿菌

血液血清雞蛋培養基生長良好。菌落呈灰白色、光滑、圓形凸起,在含有0.033%亞碲酸鉀血清培養基上生長繁殖能吸收碲鹽,並還原為金屬碲,使菌落呈黑色,為本屬其他棒狀桿菌共同特點。且亞碲酸鉀能抑制標本中其他細菌的生長,故亞碲酸鉀血瓊脂平板可作為棒狀選擇培養基。根據在此培養基上白喉桿菌落的特點及生化反應,可將白喉桿菌區分為重型(Gravis)、中間型(Intermedus)和輕型(Mitis)三型,三型白喉桿菌的分佈有所不同,常隨地區和年份有別,有流行病學意義。

抵抗力

  對濕熱的抵抗力不強,對一般消毒劑敏感。60℃經10分鐘或煮沸迅速被殺死,1%石炭酸中經1分鐘死亡,但對乾燥、寒冷和日光的抵抗力較其他無芽孢的細菌為強,在日常物品、食品及衣服上能生存多日,本菌對青黴素和常用抗生素比較敏感。

致病性和免疫性

  (一)致病性   本菌的致病物質主要是白喉毒素白喉毒素是含有兩個二硫鍵肽鏈分子量為62,000。經蛋白酶水解后,可分為A和B兩個片段,中間仍由二硫鍵聯接。B片段,無酶活性,但能與宿主易感細胞表面特異性受體結合,並通過易位作用使A片段XX細胞。A片段具有酶活性,能將氧化煙酰胺嘌呤核苷(NAD+)水解為煙酰胺及腺嘌呤二磷酸核糖(ADPR)兩部分,並催化延伸因子-2(Elongation factor-2,EF-2)與ADPR共價結合,使EF-2失去轉位活性,從而中止肽-tRNA及mRNA在核糖體上由受位轉移至供位,肽鏈不能延長,細胞蛋白質合成受阻,細胞死亡,病變產生。   僅攜帶β-棒狀桿菌噬菌體的溶源性白喉桿菌才能產生外毒素,因為白喉毒素就是β棒狀桿菌噬體毒素基因(tox+)編碼的蛋白質。tox+基因的表達與菌體無機鐵含量密切相關,鐵含量適量時, tox+基因表達,否則不表達。   白喉桿菌尚產生一些侵襲性物質,如類似於結核桿菌的索狀因子(Cord factor),能破壞細胞的線粒體膜,導致呼吸和氧化磷酸化作用受到抑制。   白喉的傳染源是白喉病人恢復帶菌者。本菌存在於假膜及鼻咽腔或鼻分泌物內,經飛沫污染物品或飲食傳播。白喉桿菌侵入易感者上呼吸道,通常在咽部粘膜生長繁殖,

白喉桿菌

並分泌外毒素及侵襲性物質,引起局部炎症和全身中毒癥狀。局部粘膜上皮細胞發生壞死,血管擴張,粒細胞浸潤及纖維滲出,因此形成灰白色膜狀物,稱為假膜(Pseudomembrane),若病損進一步擴展至喉部或氣管內,可引起呼吸道阻塞,甚至窒息。儘管細菌一般不侵入血流,但外毒素可被吸收入血,迅速與易感組織細胞結合,使心肌、肝、腎和腎上腺等發生退行XX變,並可侵犯齶肌和咽肌的周圍神經細胞,臨床上出現心肌炎軟齶麻痹聲嘶、腎上腺機能障礙,血壓下降等癥狀。本菌偶有侵害眼結膜外耳道、XX和皮膚傷口等處,也可形成假膜。   (二)免疫性   白喉病後有較強的免疫力,主要是機體能產生中和白喉外毒素的抗體(lgG)。1~5歲易感性最高,5歲以上易感性逐漸下降,成人絕大多數由於隱性感染或預防接種,已獲得免疫力。   錫克氏試驗(Schick''''s test)用於測定人體對白喉有無免疫力,確定是否需要預防接種。方法是在左前臂屈側皮內注XX0.1ml白喉毒素(含1/50的豚鼠最小致死量),同樣在右前臂屈側皮內注XX對照毒素(加熱80℃經5分鐘破壞其毒性)0.1ml,作為對照。陰XX,兩側注XX處都沒有出現紅暈或浸潤,表露機體對白喉有免疫力。陽XX,左側注XX處24~36小時后,出現圓形微隆起紅暈,逐漸形成紅腫硬塊,至第四天達最高峰,直徑達1~2cm,7~14日後反應逐漸消退,而對照側沒有反應,表示對白喉沒有免疫力。假陽XX,表示既有免疫力,又有變態反應混合反應,表示機體對白喉毒素沒有抗毒免疫力,但對毒素蛋白則有變態反應,應注意區別。

微生物學診斷

  臨床上疑似白喉的病人不必等待檢驗結果,應立即給予抗毒素和抗生素治療。但對於白喉流行期的首例病人應做微生物學檢驗予以證實。

直接染色鏡檢

  用棉拭採取假膜邊緣部滲出物,塗片,用奈瑟氏染色或美蘭染色,鏡檢有

白喉棒狀桿菌的菌體

無含異染顆粒的棒狀桿菌。結合臨床癥狀,可作出初步診斷。確診必須通過細菌培養並進行毒力試驗。

凝固血清棉拭培養法

  將沾有馬或牛血清的棉拭子放在無菌試管內,經8~10磅蒸氣滅菌20~30分鐘,並使血清凝固,且此凝固血清棉拭採取病人咽部標本,置37℃培養8~10小時后,直接塗片鏡檢。此法可作為大量檢查時快速培養診斷之用。

培養檢查

  將棉試檢材接種于雞蛋斜面或Loeffer''''s血清凝固斜面培養基及亞碲酸鉀平板培養基上,置37℃培養,待斜面或平板上長出典型的灰色疑菌落,挑取轉種到雞蛋呀或血清斜面進行分離培養,以供進一步形態染色或毒力試驗鑒定

毒力試驗

  1.豚鼠試驗 取體重250g 豚鼠2只,其中一隻試驗前12小時,由腹腔注XX白喉抗毒素250~500單位,供做對照。然後對照。然後各于皮下注XX48小時的培養液2ml,若於2~4天注XX抗毒素的豚鼠死亡,而對照豚鼠存活,便證明所試驗菌株為有毒白喉桿菌。   2.E平板試驗將浸有白喉抗毒素的無菌濾紙條貼在含20%馬血清的瓊脂平板上,然後沿濾紙條垂直方向劃線接種待測細菌,同時也接種已知產毒株和不產毒株做為對照。37℃培養48小時后,若待檢菌株產生白喉外毒素,則在濾紙條和劃線生長的菌苔交界外出現白色沉澱線。

抗菌防治

  通過革蘭氏染色法,我們發現白喉桿菌可以被染成紫色,所以白喉桿菌

白喉棒狀桿菌

屬於革蘭氏陽性菌,這在抗生素的選擇上給我們提供了依據。   在抗生素的選擇上,青黴素是首選藥物,青黴素可以通過抑制白喉桿菌細胞壁的合成而起較強殺菌、抑菌作用。一般使用時間為7~10天 用至癥狀消失和白喉桿菌培養陰轉為止。如果感染者對青黴素過敏,或應用青黴素1周后培養仍是陽性者,也可以使用紅黴素四環素。其他抗菌藥物,比如羥氨苄青黴素、利福平等也可能有效。

特異防治

  預防接種效果良好,可顯著降低發病率和病死率。6個月以上至3歲兒童應預防接種白喉類毒素百白破三聯疫苗製劑或明礬淀白喉類毒素。8歲以上錫克氏試驗陽性者也需接種。對密切接觸過白喉病人的易感兒童,可肌內注XX1000~2000單位白喉抗毒素作緊急預防,同時注XX白喉類毒素以便延長免疫力。   白喉抗毒素做為特效治療製劑,應在發病早期注XX足量的白喉抗毒素,一般用量為2萬~10萬單位,作肌肉注XX,重者可作靜脈滴注。使用抗毒素血清之前進皮膚試驗,防止發生異種血清過敏反應。使用抗毒素的同時,應給予抗菌治療,如用普魯卡因青黴素肌注,直至癥狀消失和白喉桿菌培養陰性為止。

形態染色

  白喉桿菌細長稍彎,排列不規則,常呈L、V、X、T等字形或排成柵欄狀。革蘭氏染色陽性;用美蘭液染色菌體著色不均勻,常呈著色深的顆粒;用奈瑟氏染色菌體染成黃褐色,一端或二端染成蘭色或深蘭色顆粒,稱為異染顆粒(Metachromatic granules),是本菌形態特徵之一。

培養特性

  白喉桿菌為需氧菌或兼性厭氧菌,最適溫度為37℃,最適PH為7.2~7.8,在含血液、血清或雞蛋的培養基上生長良好。菌落呈灰白色、光滑、圓形凸起,在含有0.033%亞碲酸鉀血清培養基上生長繁殖能吸收碲鹽,並還原為金屬碲,使菌落呈黑色,為本屬其他棒狀桿菌共同特點。且亞碲酸鉀能抑制標本中其他細菌的生長,故亞碲酸鉀血瓊脂平板可作為棒狀選擇培養基。根據在此培養基上白喉桿菌落的特點及生化反應,可將白喉桿菌區分為重型(Gravis)、中間型(Intermedus)和輕型(Mitis)三型,三型白喉桿菌的分佈有所不同,常隨地區和年份有別,有流行病學意義。

抵抗力

白喉桿菌

  對濕熱的抵抗力不強,對一般消毒劑敏感。60℃經10分鐘或煮沸迅速被殺死,1%石炭酸中經1分鐘死亡,但對乾燥、寒冷和日光的抵抗力較其他無芽胞的細菌為強,在日常物品、食品及衣服上能生存多日,本菌對青黴素和常用抗生素比較敏感。

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