蛋白質分離

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  蛋白質分離主要根據五種原理:分子大小、溶解度、電荷、吸附性質、對配體分子的生物學親和力等。   一、根據分子大小不同的純化方法   1.透析和超過濾   透析(dialysis)是利用蛋白質分子不能通過半透膜的性質,使蛋白質和其它小分子物質分開。常用的半透膜是玻璃紙或稱賽璐玢紙(cellophane paper)、火棉紙(celloidin paper)和其它改型纖維素材料。   2.密度梯度離心   3.凝膠過濾   二、利用溶解度差別的純化方法   1.等電點沉澱和pH控制   2.蛋白質的鹽溶和鹽析   3.有機溶劑分級分離法   4.溫度對蛋白質溶解度的影響   三、根據電荷不同的純化方法   1.電泳   2.聚丙烯酰胺凝膠電泳   3.毛細管電泳   4.等電聚焦   5.層析聚焦   6.離子交換層析   四、利用選擇性吸附的純化方法   1.羥磷灰石層析   2.疏水作用層析   五、利用對配體的特異性生物學親和力的分離純化   六、高效液相層析和快速蛋白質液相層析