硫酸鋅濁度試驗

来源:www.uuuwell.com

   

概述

  測定血漿蛋白水平分析成分肝臟疾病重要試驗之一。有關這方面的測定在別外章節中已有詳盡討論,本節中主要敘述一些和蛋白質代謝有關的簡單血清膠體穩定試驗。   各種血清膠體穩定性試驗的原理基本相同,但所用的試劑不同,促進和抑制絮濁的作用有差異,目前臨床常用的有ZnTT試驗。

醫學檢查

分類

  血液生化檢查 > 蛋白質測定

原理

  肝臟疾病時,血清蛋白的質與量有所改變,當血清和麝香草酚巴比妥液試劑作用時,麝香草酚可減低血清內脂類物質的分散力,而血清經低離子強度的巴比妥緩衝液稀釋后,球蛋白的部分溶解度降低而產生沉澱,這種沉澱是球蛋白、脂類和麝香草酚複合體,使溶液變濁,其渾濁程度與沉澱的多少與肝病的嚴重程度有一定的關係。

試劑

  (1)麝香草酚-巴比妥緩衝液(pH7.55±0.05)精確稱取巴比妥3.09g、巴比妥鈉1.69g及麝香草酚6g,倒入經煮沸除去二氧化碳的1000ml熱蒸餾水中,繼續加熱使溶解。室溫靜置過夜,若顯混濁,可加麝香草酚細末少許。並激烈振蕩使結晶析出,過濾后得透明溶液。此液pH7.55±0.05,裝瓶內塞緊貯室溫備用。若發現混濁丟棄不用。   (2)48.1mmol/L氯化鋇標準液:精確稱取氯化鋇二水合物1.175g,用水溶解並轉移入100ml容量瓶內,再以水稀釋至100ml刻度。   (3)0.1mol/L硫酸:用1mol/L氫氧化鈉標定。

操作方法

  吸新鮮血清0.1ml,加入麝香草酚巴比妥緩衝液6ml(如血清用半量,緩衝注亦用半量),混和。室溫靜置30min后,將測定管顛倒混勻數次后,用分光光度計于650nm進行比濁,將比色杯置於比色座的遠光電管端。以水校正吸光度到零點,讀取各管讀數,從標準曲線上查出單位數。   (1)硫酸鋇混懸原液的配製,于100ml容量瓶內,加入0.1mol/L硫酸約70ml,冷至10℃,滴加48.1mmol/L氯化鋇溶液2.70ml(邊滴邊搖),再以0.1mmol/L硫酸稀釋至刻度。混勻后即成具有麝香草酚濁度20u的原液。   (2)將硫酸鋇混懸液配成各種不同濃度的標準比濁液:   (3)用分光光度計于650nm進行比濁,比濁前將管內液體溫和地顛倒混和10次,將比色皿置於比色座的遠光電管端,以水校正吸光度到零點,讀取各管吸光度讀數,與其對應的單位數作圖,繪成標準曲線。   附註:   (1)配製硫酸鋇標準比濁管時注意以下幾點:①硫酸試劑的濃度硫酸在反應中雖然是過量的,但當濃度小於0.1mol/L,形成的硫酸鋇濁度低;濃度大於0.1mol/L濁度增高。因此,硫酸試劑須嚴格校正至0.1mol/L。②反應溫度:10℃時形成的硫酸鋇顆粒細,濁度較高,結果重複性好。25℃、30℃、37℃時形成的顆粒較粗,濁度較低,重複性不易控制。③操作手法:混和方法不同,形成的硫酸鋇顆粒大小不同,結果相差很大。所以,每次按規定操作可提高精密度。   (2)麝香草酚緩衝液易變質,但如保存于冰箱中,可因結晶逐漸析出而降低敏感度,故平時使用時,仍應置室溫中,如顯混濁,即不能用。   (3)麝香草酚應為潔白晶體,如帶黃色,須重結晶處理。可按下法重結晶精製:取麝香草酚100g,溶於100ml 95%乙醇中,以吸濾漏斗過濾。濾液中加入于100ml冷蒸餾水,混勻。靜置20min后吸濾,用冷蒸餾水洗結晶兩次,可得到潔白的結晶,置乾燥器內待完全乾燥后使用。   (4)用巴比妥配製的試劑不能久置,超過2周后,TTT結果有增高趨勢,一個月后明顯偏高。一般認為此試劑不穩定與巴比妥有關,因為久置后,巴比妥試劑的紅外線吸收曲線已有明顯變化。本文所介紹麝香草酚-Tris-HCl緩衝液,具有穩定性高,所配TTT試劑放室溫至少可保存3個月,且濁度結果受室溫變化的影響小。   (5)光電比濁法與光電比色法有所不同,比濁法混濁液除了吸收一部分入XX光以外,懸浮的顆粒還能使一部分入XX光反XX和折XX,因此光電池所感受的光除了經過吸收以後的出XX光外,還有折XX的光,後者不是平行光束,混和液和光電池之間距離越大,則折XX光的影響越小。所以在採用72型分光光度計比濁時,比色杯的位置應放在比色杯座的遠光電池的一邊,可以提高準確度。   (6)麝香草酚緩衝液中麝香草酚含量是影響結果的重要因素之一。濁度單位高低和麝香草酚含量成正比,要求使用25℃的麝香草酚飽和溶液

正常值

  2~12U。

臨床意義

  (1)顯著增高:   ①肝病:肝硬化慢性肝炎活動期、肝細胞癌急性肝炎自身免疫性肝炎等。   ②非肝病:慢性炎症膠原性疾病結核、類肉瘤病、多發性骨髓瘤惡性腫瘤等。   (2)顯著降低:肝內膽汁瘀滯、肝外膽汁瘀滯、多發性骨髓瘤、伴高度蛋白尿的疾病、長期使用腎上腺皮質激素、長期使用免疫抑製劑、抗腫瘤葯等。

相關疾病

  多發性骨髓瘤 肝硬化 類肉瘤病