凝固酶陰性葡萄球菌

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簡介

  葡萄球菌臨床較常見的感染菌,隨著大量頭孢菌素尤其是第三代頭孢菌素等高效廣譜抗菌藥物的廣泛使用,耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)在全球範圍內不斷增加,耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)作為MRS和凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)家族中的一員,其檢出率和多重耐藥性呈逐年增高趨勢,已成為醫院感染的主要病原菌之一。MRCNS為低毒力條件致病菌,感染后癥狀不典型,且呈現多重耐葯現象,給臨床診斷治療帶來一定困難,高效的檢驗方法已是必然需要。

鑒定方法

血漿凝固酶玻片法、試管

  材料 菌株實驗保存菌株,新鮮未稀釋的兔血漿(或人血漿),生理鹽水金黃色葡萄球菌(ATCC25923)與表皮葡萄球菌(ATCC12228)質控菌株。   方法 玻片法:取未稀釋的新鮮兔血漿和生理鹽水各一滴分別滴于載玻片,取待檢菌菌落少許,分別混合,立即觀察結果,細菌聚集成團塊或無法混勻為陽性,反之陰性,用於測定凝集因子;試管法取3支試管,各加0.5ml1:4稀釋的新鮮兔血漿,加1~3個菌落入1試管,充分研磨均勻,2、3試管加凝固酶陽性、陰性株作對照,置37℃水浴3~4h,觀察結果,細菌是試管內血漿凝固呈膠凍狀為陽性,反之為陰性,用於測定遊離型凝固酶。   方法評價 公認採用兔血漿較好,目前許多實驗室用病人血漿或血庫血漿來代替,因病人血漿中含有各種抗體、藥物,尤其某些病人血漿中纖維蛋白含量低下或受各種不同抗凝劑的影響甚至血漿被污染,故一定程度上影響了結果的準確性。採用玻片法檢測凝聚因子,有10%~15%金黃色葡萄球菌呈假陰性,因此必須用試管法驗證凝聚因子試驗

血漿凝固酶陰性葡萄球菌兩步法

  材料 鹼性磷酸酶試劑盒上海長征公司產品;蕈糖、尿素鳥氨酸脫羧酶生化試驗管與新生霉素葯敏紙片、磷霉素葯敏紙片購自美國BD公司;厭氧硫乙醇酸鹽肉湯用Brewer配方,液面加凡士林滅菌后換無菌橡皮塞。   方法 尿素、鳥氨酸脫羧酶試驗管接種細菌後用消毒液石蠟覆蓋;鹼性磷酸酶試驗。   方法評價第一步鑒定出現相似結果的菌株,可根據提示選用第二步鑒定程序以省時並減少消耗。不能用本法鑒定的科恩、木糖松鼠、緩慢葡萄球菌在人體內感染極為少見,必要時可用氧化酶、木糖、甘露醇等並參考有關資料進行鑒定。兩步法低耗高效,有較高的實用價值

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